1. استفاده ازandrotec andrographolide 
Adrotec aدروگرافولید یک مهارکننده NF-kB است که از طریق اصلاح کووالانسی باقیمانده سیستئین روی p50 در سلولهای اندوتلیال، فعالسازی NF-kB را بدون تأثیر بر تخریب IκB یا جابهجایی هستهای p50/p65 مهار میکند.
2. فعالیت بیولوژیکی آندروگرافولید
در شرایط آزمایشگاهی: آندروگرافولید (AP) به طور وابسته به غلظت، فعال کننده گیرنده لیگاند هسته ای کاپا B (RANKL) تمایز استئوکلاست و تحلیل استخوان را در شرایط آزمایشگاهی سرکوب می کند و بیان مارکرهای اختصاصی استئوکلاست را کاهش می دهد. آندروگرافولید با مهار فعالسازی NF-kB ناشی از TNF از طریق اصلاح کووالانسی Cys62 کاهشیافته p50، بدون تأثیر بر تخریب IκB یا انتقال هستهای p50/p65، التهاب را کاهش میدهد. آندروگرافولید همچنین مسیر سیگنال دهی ERK/MAPK را بدون تأثیر بر سیگنالینگ p38 یا JNK مهار می کند. آندروگرافولید تمایز استئوکلاست سلول های RAW 264.7 را به روشی وابسته به غلظت مهار می کند. آندروگرافولید تشکیل استئوکلاست را به روشی وابسته به غلظت و بدون هیچ گونه اثرات سیتوتوکسیک آشکار، در هر دو سلول BMM و RAW 264.7 سرکوب می کند. درمان آندروگرافولید به طور قابل ملاحظه ای ناحیه تحلیل استخوان را کاهش می دهد. تنها حدود 30 درصد از تحلیل استخوان مشاهده شده در گروه کنترل پس از درمان با 2.5 میکرومولار آندروگرافولید حاصل می شود. تحلیل استخوان استئوکلاستیک تقریباً به طور کامل پس از درمان با 10 میکرومولار آندروگرافولید مهار می شود.
In Vivo: درمان با آندروگرافولید (5 یا 30 میلی گرم بر کیلوگرم) میزان از دست دادن استخوان ناشی از LPS را کاهش می دهد. علاوه بر این، آندروگرافولید کمی BMD و ضخامت قشر را در مقایسه با درمان LPS افزایش می دهد. بررسی بافت شناسی اثرات محافظتی آندروگرافولید بر تحلیل استخوان ناشی از LPS را تایید می کند. تزریق LPS منجر به فرسایش التهابی استخوان و افزایش تعداد استئوکلاست های TRAP مثبت می شود.
سنجش کیناز: سنجشهای استئوکلاستوژنز در شرایط آزمایشگاهی برای بررسی اثرات آندروگرافولید بر تمایز استئوکلاستها انجام میشود. سلول های ماکروفاژهای مغز استخوان (BMM) آماده می شوند. به طور خلاصه، سلولهای استخراجشده از استخوان ران و تیبیای یک موش یک هفتهای C57/BL6 در محیط کشت کامل سلولی و 30 نانوگرم بر میلیلیتر M-CSF در T{6}} انکوبه شدند. فلاسک cm2 برای تکثیر. هنگام تعویض محیط، سلول ها شسته می شوند تا سلول های استرومایی باقیمانده تخلیه شوند. پس از رسیدن به تلاقی 90 درصد، سلول ها سه بار با PBS شسته شده و به مدت 30 دقیقه تریپسین می شوند تا BMMs برداشت شوند. سلول های چسبیده به کف ظرف به عنوان BMM طبقه بندی می شوند. این BMM ها در صفحات چاهک با تراکم 8×103 سلول در هر چاه در سه تکرار و در یک انکوباتور مرطوب حاوی 5 درصد CO2 در دمای 37 درجه به مدت 24 ساعت انکوبه می شوند. سپس سلول ها با غلظت های مختلف آندروگرافولید (0، 2.5، 5 یا 10 میکرومولار) به علاوه M-CSF (30 نانوگرم در میلی لیتر) و RANKL (50 نانوگرم در میلی لیتر) تیمار می شوند. پس از 5 روز، سلول ها برای فعالیت اسید فسفاتاز مقاوم به تارتارات (TRAP) ثابت و رنگ آمیزی می شوند. سلول های چند هسته ای TRAP مثبت با بیش از پنج هسته به عنوان استئوکلاست شمارش می شوند.
سنجش سلولی: اثرات آندروگرافولید بر تکثیر سلولی با CCK{0}} تعیین میشود. BMMها در صفحات چاهک با چگالی 3×103 سلول در هر چاه در سه تکرار قرار می گیرند. 24 ساعت بعد، سلول ها با افزایش غلظت اندروگرافولید (0، 2.5، 5، 10 یا 20 میکرومولار) به مدت 2 روز تحت درمان قرار می گیرند. سپس 10 میکرولیتر CCK{13}} به هر چاهک اضافه میشود و سپس صفحات در دمای 37 درجه به مدت 2 ساعت دیگر انکوبه میشوند. سپس چگالی نوری (OD) با یک میکروپلیت خوان جذبی ELX800 در طول موج 450 نانومتر (مرجع 650 نانومتر) اندازه گیری می شود. بقای سلول محاسبه می شود.
سرپرست حیوانات: موشهای موش C57BL/6 (8 هفتهای) به چهار گروه هفت تایی تقسیم میشوند. به موشها آندروگرافولید (5 یا 30 میلیگرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن) یا PBS به عنوان کنترل 1 روز قبل از تزریق LPS (5 میکروگرم بر گرم وزن بدن) تزریق میشود. آندروگرافولید یا PBS یک روز در میان به مدت 8 روز به صورت داخل صفاقی تزریق می شود. LPS در روزهای اول و چهارم به صورت داخل صفاقی تزریق می شود. همه موشها 8 روز پس از تزریق اولیه LPS کشته میشوند و استخوان ران چپ همه حیوانات با یک میکرو CT با وضوح بالا با وضوح 9 میکرومتر اسکن میشوند.
مشخصات
98 درصد
مزایای ما
1. تحویل سریع. تضمین کیفیت
2. تیم تحقیق و توسعه ما متشکل از فارغ التحصیلان فوق دکترا، بیولوژیکی و مواد غذایی با قابلیت های مستقل تحقیق و توسعه است.
3. ارائه خدمات بسته بندی سفارشی. خدمات OEM شامل: نرم ژل، کپسول، قرص، ساشه، گرانول و غیره. خدمات برای تولید محصولات خاص مشتری با بیش از 100 مشتری در سراسر جهان.
4. بیش از 10 سال تجربه در تولید گیاهان دارویی تحت استاندارد GMP. تجربه کامل در کنترل کیفیت و کاربرد عصاره های گیاهی.
